分光光度法测定的条件实验

分光光度法测定的条件实验

一、目的与要求
1．学习通过实验条件的优化，建立元素的分光光度测定法
2．掌握紫外－可见分光光度计的使用方法
二、预习与思考
1．有机化合物中常见的电子跃迁类型有哪些？
2．说明溶液颜色和吸收曲线峰值波长有何关系？ 答案：互补色的光决定的。
三、实验原理
在可见区分类光度测定中，通常将被测物质与显色剂反应，使之生成有色化合物；然后测量其吸光度，进而求出被测物质的含量，因此，显色反应的完全程度与吸光度的测量条件都将影响测定结果的准确度与灵敏度。
在建立光度分析方法时，为了获得较佳的实验结果，一般需要通过条件实验来确定最优体系，条件实验内容包括：介质酸度、显色剂浓度、反应温度、显色时间、稳定性、测量波长、工作曲线、干扰实验以及精密度、准确度等。实验方式一般先改变其中一个因素(如pH)，暂时固定其它因素，测量显色后溶液的吸光度；通过吸光度～pH(或其它因素)曲线确定显色最佳酸度范围。